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子宫内膜异位症标准化建模平台：复刻炎症病理，加速妇科新药验证

　　导语

　　子宫内膜异位症(Endometriosis, EMS)是一类雌激素依赖、孕激素抵抗、以慢性盆腔炎症为主要特征的良性增殖性疾病，其核心病理特征包括异位内膜种植、炎症微环境重塑、血管新生增强及巨噬细胞浸润异常。在基础研究与药物开发中,模型稳定性与表型一致性直接决定药效评价的可靠性。

　　艾菱菲生物基于 BALB/c 雌性小鼠,建立了标准化腹壁腹膜异位移植型子宫内膜异位症模型，并结合形态学 + 病理学 + 免疫组化 + 炎症因子检测进行系统验证，同时用于候选药物的药效评估。

　　01 实验设计

　　本研究共设4组:G1 假手术对照组、G2 EMS 模型组、G3 EMS 模型 + Positive Control 1、G4 EMS 模型 + Positive Control 2，每组 N=6。造模成功后开始给药,连续给药 3 周，末次给药后取材,进行大体形态学、病理学、免疫组化及炎症因子检测。

　　

 

　　02 模型构建策略

　　本模型采用同基因子宫内膜腹壁腹膜面贴附移植法，结合外源性雌激素诱导，模拟异位内膜在腹腔内的存活与增殖过程。

　　| 动情周期同步化，降低供体来源变异

　　造模前7天(D-7)对供体小鼠皮下注射苯甲酸雌二醇进行预处理。连续5天，同期每日阴道涂片监测动情周期,取材当日选取涂片显示为动情前期(proestrus)/动情期(estrus)的供体小鼠子宫，保证所有供体子宫内膜处于一致的生理时相，降低因周期波动导致的成模不均和病灶大小差异。

　　| 腹壁异位种植造模

　　无菌分离供体子宫，剪取子宫内膜片段，功能面朝向腹腔贴附固定于受体小鼠腹壁腹膜内侧面，对位缝合。术后按方案腹腔补充苯甲酸雌二醇，以模拟高雌激素微环境，支持异位病灶定植、增殖和血管新生。

　　03 EMS小鼠模型建立与验证

　　| 动情周期同步性良好

　　供体小鼠阴道涂片显示动情周期同步，保障了取材内膜的时相一致性，降低了周期波动对成模的影响。

　　| 异位灶典型表现

　　造模后各组小鼠移植内膜表面及邻近区域可见新生血管形成，异位灶呈透明或半透明囊泡状，内含清亮液体，颜色为暗红或棕色，大体形态学符合典型 EMS 病灶特征，提示模型构建成功。

　　| HE 染色显示活性组织与炎症浸润

　　移植组织HE染色可见完整的子宫内膜腺体和间质细胞，并伴有炎性细胞浸润，提示异位内膜具有组织存活能力且伴炎症反应激活。

　　

 

　　04 药效评价体系

　　1.体重变化

　　造模后G2模型组和G4组小鼠体重较G1对照组显著下降(P<0.05)，随后逐渐回升至接近正常水平;G3组体重与G1组无显著差异(P>0.05)。每组N=6。图中*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。

　　2. 病灶形态学对比

　　取材大体观察结果显示，G3(Positive Control 1)与G4(Positive Control 2)干预均可减小异位病灶体积，其中G4组的病灶数量及腹腔粘连程度较模型组减轻更明显。

　　3.HE组织学差异(子宫内膜&异位灶)

　　异位病灶: G2模型组病灶组织结构紊乱，可见较多异常空洞及散在出血点;G3干预组病灶中心多见较大空泡内含清亮液体，并伴有一定出血;G4干预组空洞数量减少、范围有所缩减，出血较模型组明显减轻。

　　子宫内膜: Positive Control1 干预可降低子宫内膜出血发生率，减少异常形态腺体的数量;Positive Control 2 干预可显著改善腺体形态，使其接近正常子宫内膜结构。

　　

 

　　4.免疫组化(Iba-1，巨噬细胞浸润标志

　　Iba-1(离子钙结合衔接分子 1)是巨噬细胞常用标志物，反映组织内巨噬细胞浸润水平。

　　异位病灶: G2模型组 Iba-1 阳性细胞比例显著高于 G3(P<0.001)和 G4(P<0.001)干预组。

　　子宫内膜: G2模型组阳性细胞比例显著高G1对照组(P<0.001);G3干预组、G4干预组分别较G2显著降低(G3: P<0.01;G4: P<0.001)。

　　5. 炎症因子检测(ELISA)

　　腹腔灌洗液ELISA检测显示，G3和G4干预组的IL-6、TNF-α 及 IL-1β水平较G2模型组均显著降低(P<0.001)。

　　

 

　　05 模型特点

　　本模型具备以下核心优势：

  1. 稳定性与均一性较高：动情周期同步化和雌激素水平维持共同保证病灶大小、生长状态的一致性;
  2. 周期可控：全程约 6 周，造模完成后可稳定开展药效评价;
  3. 病理表型完整：覆盖异位种植、血管新生、腹腔粘连、炎症浸润、组织结构异常等 EMS 主要表型;
  4. 多层次评价：整合大体形态、组织病理、免疫组化及炎症因子检测，便于结果交叉验证与追溯。

　　06 经验总结

  1. 供体同步化和外源雌激素稳定维持是模型均一性的核心;
  2. 手术操作稳定性决定异位灶植入位置和大小的一致性;
  3. 给药时相严格对齐(时间、剂量、途径)是药效可比性的前提;
  4. 样本处理全程低温化是 ELISA、免疫组化等下游数据真实性的基础;
  5. 全流程记录(动情周期涂片、手术记录、给药记录、取材位置示意)是模型可重复性的关键保障。

　　07 结语

　　艾菱菲生物标准化 EMS 小鼠模型在低异质性、高稳定性、病理表型完整、药效评价窗口清晰等方面表现良好，适用于子宫内膜异位症发病机制研究、腹腔炎症微环境解析、创新药物筛选、药效学评价、生物标志物验证等临床前研究场景。

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