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脑缺血MCAO动物模型


脑缺血MCAO动物模型

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脑缺血动物模型介绍

大脑动脉(MCA)是脑卒中多发部位,因此MCAO(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)动物模型是国际上广泛认可的局灶性脑缺血的标准动物模型,其致病机理与人类的脑缺血症状相似。主要构建方法:开颅机械闭塞法、光化学法、线栓法、栓塞法。其中线栓法为近年来最常用的构建方法,此方法不需要开颅且不需要呼吸机等仪器辅助,缺血部位较恒定,能够准确控制缺血及再灌注时间,容易控制局部条件,全身影响小,是制作脑局部缺血再灌注损伤模型最理想的方法。

艾菱菲生物脑缺血动物模型平台服务优势

依托成熟的MCAO造模体系与丰富的脑卒中研究经验,为脑缺血机制研究及神经保护药物评价提供快速、稳定、高重复性的在体解决方案。

模型覆盖全面

经典模型

采用线栓法(MCAO)造模,无需开颅,对动物损伤小,模型重复性好。

建模过程标准化

稳定可靠

标准化手术流程结合经验丰富的技术团队,保障造模稳定性和一致性。

多维评价体系

多维验证

Longa评分、Bederson评分结合TTC染色,全面验证模型表型。

适配多周期研究

全程留痕

保留造模关键节点照片及原始记录,实现实验过程可追溯。

数据交付规范化

快速交付

标准化在体解决方案,满足脑缺血机制研究及药效评价需求。

造模周期 24 hours, 3 days or 7 days

1 实验动物

SPF级别的大、小鼠

1 阳性药物

依达拉奉、丁苯酞、尼莫地平

1 应用领域

脑卒中药效评价、神经保护研究、脑缺血再灌注损伤机制、干细胞/外泌体治疗评价

实验结果

MCAO动物模型构建

线栓法:在颈总动脉下方以及颈外进行结扎,并在近心端的颈总方向进行预穿线。

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造模关键节点照片

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行为学检测

要在动物缺血24h后再进行评分,方法主要有两种,分别为Longa评分法和Bederson评分法。表型分析:对侧转圈

0分:无神经损伤症状
1分:不能完全伸展对侧前爪
2分:向对侧转圈
3分:向对侧倾倒
4分:不能自发行走,意识丧失脑组织TTC染色

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脑组织TTC染色

TTC 染色结果显示,模型组脑组织切片可见明显的白色梗死灶,提示脑缺血模型造模成功;给药组梗死面积较模型组显著减小,提示药物可有效减轻脑缺血所致的脑组织损伤。

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注意事项

01 术后需注意保暖,缺血时间内和缺血后的小鼠需在热台上加热,设置温度38℃;
02 术中在缺血时间内,需给伤口处滴生理盐水润湿,以防干瘪;
03 术后护理:造模当天需注射抗生素,拜有利0.1ml原液稀释50倍,10ul/g;
04 术后需每天灌胃羊奶粉,3-4次,灌胃每次0.5ml。

丁苯酞(NBP)治疗数据

01 脑水肿和脑组织BBB通透性检测

与Sham 组比较,I/R组脑含水量显著增加, P<0.01;与I/R组比较,NBP预处理组脑含水量显著减少,P<0.01。与Sham组比较,I/R组脑EB含量显著增加,P<0.01;与I/R组比较, NBP预处理组脑EB含量显著减少,P<0.01。1

02 免疫组化检测结果

与假手术组(0.27±0.03)比较,模型组大鼠脑组织MMP-9阳性表达的平均光密度值(0.48±0.07)明显增加;与模型组比较,NBP 预处理组大鼠脑组织MMP-9阳性表达的平均光密度值(0.35±0.05)明显的降低( P<0.01)。

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03 Western Blot检测结果

与假手术组(0.41±0.04)比较,模型组大鼠脑组织MMP-9阳性表达的平均光密度值(1.12±0.17)明显增加;与模型组比较,NBP 预处理组大鼠脑组织MMP-9阳性表达的平均光密度值(0.48±0.05)明显的降低(P <0.01)。

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参考文献:丁苯酞预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及可能机制。