PRELINICAL CRO
临床前CRO服务
膜片钳实验
膜片钳实验，也称为单通道电流记录技术，是一种在生物学和神经科学研究中广泛应用的实验方法。以下是关于膜片钳实验的详细解释：
一、实验原理
膜片钳实验通过特制的玻璃微吸管吸附于细胞表面，形成高阻封接（又称giga-seal，即巨阻封接），其电阻可达数个或数十千兆。这种封接将吸附在微电极尖端开口处的一小片膜与其余部分的膜在电学上完全隔离开来。然后对该膜片实行电压钳位，可测量单个离子通道开放产生的pA（10的负12次方安培）量级的电流。这种通道开放是一种随机过程，通过观测单个通道开放和关闭的电流变化，可以直接得到各种离子通道开放的电流幅值分布、开放几率、开放寿命分布等功能参量。
二、实验步骤
准备阶段：选择合适的细胞，并准备好特制的玻璃微吸管和实验设备。
吸附阶段：将玻璃微吸管轻轻吸附在细胞表面，通过施加适当的负压，使微吸管与细胞之间形成高阻封接。
钳位阶段：对膜片实行电压钳位，以控制细胞膜的电位。
记录阶段：记录单个离子通道开放产生的电流变化，并分析其功能参量。
分离阶段（可选）：将吸管吸附的膜片从细胞膜上分离出来，以膜的外侧向外或膜的内侧向外等方式进行实验研究。
三、技术特点
高灵敏度：能够测量到单个离子通道开放产生的pA量级的电流。
高分辨率：具有1pA的电流灵敏度、1μm的空间分辨率和10μs的时间分辨率。
广泛应用：可用于金属离子作用于细胞膜行为的研究、细胞膜离子通道的性质鉴定及其动力学研究、细胞分泌的研究等领域。
四、应用举例
离子通道研究：膜片钳技术可以直接观察和分辨单离子通道电流及其开闭时程，区分离子通道的离子选择性，并发现新的离子通道及亚型。
细胞分泌研究：可用于研究细胞信号的跨膜转导和细胞分泌机制。
药物作用分析：利用膜片钳技术还可以用于药物在其靶受体上作用位点的分析。
五、注意事项
膜片钳实验操作有一定难度，需要操作人员进行系统学习理论知识和长时间的实践练习。在实验操作过程中，实验人员必须要注意诸多细节，如微吸管的制备、细胞的选择、电压钳位的设置等，以确保记录到可靠的细胞电信号。
江苏艾菱菲生物科技有限公司
地址：江苏省南京市江北新区龙泰路8号润诚科技园8号楼
邮编：210007
18020168061
邮箱：info@aniphebio.com（咨询）
邮箱：order@aniphebio.com（订购）
微信公众号
© COPYRIGHT 2022 江苏艾菱菲生物科技有限公司 ALL RIGHTS RESERVED
