干货 | 为什么我的Dio造模总失败？

发布时间：

2022-12-09 14:27

导读

Dio模型小鼠建模方法简单、应用广泛，很多人都会选择自行建模。但是如果操作人员操作经验不足、细节处理不到位，会导致小鼠体重增长缓慢甚至减轻，进而影响葡萄糖代谢。

今天小编结合相关报道和实际遇到的问题整理分析，给大家分享Dio模型小鼠构建过程中的经验和技巧，帮助小伙伴们提高Dio模型构建的稳定性和一致性。

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高脂诱导肥胖小鼠是当前研究肥胖和二型糖尿病常用的模型。通常选用6周龄左右的C57BL/6J小鼠、配合60kcal% 高脂肪饮食造模。这种方法诱导的小鼠表型与人类早期糖尿病和代谢疾病患者的症状相似，主要包括体重增加、血糖升高和葡萄糖不耐受等。

饲料

Dio小鼠一般喂食60%的高脂肪饲料——D12492，这种饲料目前主要有进口（Research Diets）和国产两种，实际饲养过程中两种饲料的区别不大，都能达到最终的建模需求，大家可以根据自身的预算选择采购。

因饲料脂肪含量高，需要将饲料短期冷藏（4℃）或冷冻（-20℃）贮存。每周更换1-2次食物，以免变质。很多文献中提到高脂饲料不需要额外解冻，不过根据饲养员的观察，在饲喂前将饲料恢复至室温后小鼠更爱吃。饲料多放一些在笼盒内，确保小鼠随时都能进食。这样做是为了促进小鼠体重增加，尤其是当小鼠体型变得很大并且难以直立的时候，它们在笼盒内进食更为方便。

很多实验方案设计时需要检测小鼠采食量，但是笼盒底部的饲料可能会影响采食量计算的准确性。因此小编认为采食量只是一个侧面的数据反映，最主要的还是要保证小鼠可以较容易地获得足够的食物。

饮水

要保证小鼠随时都能喝到水。很多小伙伴在造模时都将注意力集中在饲料上，对于饮水的关注不足。及时关注水瓶中的水量，高脂小鼠的饮水量要比常规的小鼠饮水量高。让高脂小鼠保持充足的水分，也能够促进小鼠体重增加。

体重

有数据表明小鼠的初始体重对于后期体重增长也有影响。因此在采购小鼠的时候，建议挑选体重较大且均一的小鼠：一般是6周龄，体重18g左右开始喂养。

在运输过程中，小鼠体重减轻是正常现象。通常在送达后一两周恢复体重。因此，在实验开始前要给予小鼠一个1-2周的适应期。

戳这里查看小鼠体重变化表

环境

为小鼠提供舒适的生活环境，也有助于体重增长。如果是同窝出生的小鼠，打架的可能性更低。单独饲养的小鼠可能不如集体饲养的小鼠更容易肥胖，每一笼小鼠如果数量太少会导致小鼠为了保温而消耗更多的卡路里。除了日常换笼，更换饲料饮水等，尽可能少的打扰小鼠。

不要将来自不同笼或者不同包装盒的小鼠放在一起。混合饲养会出现打架现象，从而影响体重增长。

温度控制也是重要的饲养因素：建议将高脂小鼠饲养在恒温26℃左右的环境中，太高的饲养温度可能会把小鼠热死，如果把高脂小鼠养在标准动物房的22±2℃的环境中，它们需要消耗热量来维持自己的体温。

不过也有研究表示，高脂小鼠的适宜饲养温度为29-32℃。小伙伴们及时注意观测小鼠状态，如果出现毛发变湿润的情况就代表室温太高了，及时调整室温。

垫料

很多动物房都习惯使用玉米芯垫料，这个垫料对于普通小鼠的影响不大。但是在高脂诱导小鼠中，因为高脂饲料的适口性不好，小鼠会倾向于啃食玉米芯垫料并且吃得饱饱的，影响高脂饲料的进食量，从而影响体重增加。因此在Dio模型造模时建议使用刨花垫料。另外可以考虑额外使用碎纸屑，确保胖小鼠的身体体感温度稳定。

血糖检测

测量高脂小鼠血糖水平的最佳时间是在清晨。因为小鼠晚上进食，所以清晨的葡萄糖水平是非空腹血糖。测量老鼠体内的葡萄糖水平，最重要的是在一天中的同一时间对老鼠进行取样，以提高研究数据的一致性。

备用小鼠

Dio小鼠造模有一定的失败率，所以建议小伙伴们每批次实验造模都额外订购5-10%的小鼠。因为有些小鼠对高脂饲料不敏感。

参考链接：

https://www.jax.org/news-and-insights/jax-blog/2014/may/seven-tips-every-Dio-mice-user-should-know

Seeley, R.J., MacDougald, O.A. Mice as experimental models for human physiology: when several degrees in housing temperature matter. Nat Metab (2021).

https://doi.org/10.1038/s42255-021-00372-0

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