干货 | 部分染色的病理分析

发布时间：

2022-12-14 16:52

导读：

病理分析是探讨器官、组织或细胞所发生的疾病过程，探讨病变产生的原因、发病机理、病变的发生发展过程，最后做出病理诊断。

本期干货知识带大家学习部分染色的病理分析。

病理形态学的检查方法：首先观察大体标本的病理改变，然后切取一定大小的病变组织，用病理组织学方法制成病理切片，用显微镜进一步检查病变，或对整个切片进行扫描。

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染色针对不同的组织情况，通过观察空白组及实验组不同的染色结果来确认病变情况，也可以通过软件来计算病变组织（染色部位）的面积比例。

HE染色（苏木精——伊红染色法）

HE染色（苏木精—伊红染色法），是石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。

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正常小鼠肝脏HE染色

人甲状腺癌裸鼠移植瘤

如图，可以看到对照组的移植瘤内细胞呈弥漫性生长，排列密集紊乱，未见组织结构，癌细胞胞浆较丰富，细胞核相互重叠，异型性明显，可见典型的病理性核分裂现象，符合甲状腺乳头状癌特点。

实验组的移植瘤内细胞数量减少，胞浆淡染，细胞核淡染，核仁体积小，核分裂现象减少，核浆比例减少，部分出现核固缩、核溶解，细胞崩解，结构消失。

如图，热射病模型组大鼠脑组织神经元细胞数少于空白对照组；药物治疗组神经元细胞数高于热射病模型组。

通过对比空白/对照组，观察细胞形态的变化，细胞核或者细胞质的变化

MASSON染色（马松染色）

Masson（马松染色）是结缔组织染色，多用于观察病变组织中纤维结缔组织的增生和分布。胶原纤维组织有缓冲作用，可保护周围的血管、神经。胶原纤维增生通常是由于局部皮肤出现炎症或组织增生。

检验结果是胶原纤维呈蓝色，肌纤维染红色、胞核染蓝黑色。

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正常大鼠肾 Masson染色

如图为正常大鼠的肾脏染色，需要我们观察如下指标：

（1）器官硬化性疾病的观察：如肝硬变、心肌瘢痕的观察，胶原染色更易于观察诊断。

（2）瘢痕与淀粉样物质鉴别：前者胶原纤维染色为阳性，后者为阴性。

（3）骨纤维异常增殖病与骨纤维化的鉴别：利用胶原纤维染色可较易观察前者胶原纤维紊乱，纵横交错，后者较规则。

如图，光镜下犬正常睾丸白膜内分布有明显的胶原纤维（图D）；隐睾生精小管管壁褶皱，管壁胶原纤维较正常睾丸明显增厚（图E）；睾丸肿瘤局部胶原纤维增生（图F）。

Masson染色可以用来观察胶原纤维和肌纤维的分布情况，可使用软件半定量分析胶原纤维的含量比例。

治疗之后，实验组蓝色的胶原纤维分布呈细网状分布，而Control组的胶原纤维成分呈片状分布。Control组胶原纤维沉积明显多于实验组。利用Image J软件计算组织中胶原纤维含量，实验组的胶原纤维含量显著低于Control组，两组之间有统计学差异(p<0.05)。

说明实验组治疗能够降低肿瘤组织中的胶原纤维成分，减少药物递送的距离和阻力，从而使得更多的药物达到血管远处的肿瘤细胞，增强化疗效果。

油红O染色

由于油红为脂溶性染料，在脂肪内能高度溶解，可特异性的使组织内甘油三酯等中性脂肪着色为红色。因为脂肪易溶于有机溶剂，所以油红O染色需要用新鲜的冰冻切片。

油红O染色主要用于显示组织器官的脂肪变性和类脂质的异常沉着。这类情况常发生于肝、肾、心等实质脏器的脂肪变性。

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脂肪肝油红O染色

如图为动脉粥样硬化模型小鼠与对照小鼠的油红O染色图。从中我们可以看到：动脉粥样硬化（AS）模型组小鼠主动脉粥样斑块面积较正常对照组明显增大。与模型组比较，Sal B、ATO干预后明显减小斑块面积(p<0.05)。对照小鼠肝组织结构正常且清晰，MOD小鼠肝组织结构紊乱，出现炎性细胞浸润灶、气泡性脂肪变。与MOD对比，Sal B、ATO组小鼠肝组织病理变化得到明显改善。

油红O染色可以用来观察脂肪的分布情况，可使用软件半定量分析脂肪的含量比例。

一般分析方法

1、进行病理分析时需要有对照组，实验组与对照组进行对比分析；

2、根据需要研究的方向确定合适的染色方法；

3、使用软件进行半定量分析。

定量分析