疾病模型 | 变态反应性脑脊髓炎（EAE）动物模型

发布时间：

2023-02-03 11:25

导读：

实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）动物模型的症状、病理改变以及免疫学特征与人类的多发性硬化症（multiple sclerosis,MS）、急性播散性脑脊髓炎相似，因此该模型被认为是这类疾病理想的动物模型。

实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE)是由 T淋巴细胞介导的发生于易感动物的自身免疫病，主要特征为中枢神经系统(CNS)血管周围单个核细胞浸润和白质脱髓鞘。

选用动物

由于不同品种的动物、或同一品种不同品系的动物存在不同的遗传背景，其表现为免疫系统的T细胞克隆株对自身抗原反应不同，因此实验动物需要选择对EAE模型敏感的动物。

从鸟类到哺乳类，多种动物均可诱发EAE，对EAE敏感的动物有Lewis大鼠、DA大鼠、PL小鼠、SLJ小鼠、豚鼠等。

鼠的EAE模型无论在临床表现、病理、免疫、生化改变等方面都与人类临床较为相似，因此在动物模型制备上我们常常选用大鼠（Wistar大鼠，200~220g）或小鼠（C57BL/6雌性小鼠，6-8周）。

构建方法

主要分为主动诱导法和被动诱导法。

1、主动诱导法

（1）制备抗原，并与佐剂混合制成抗原乳剂。

（2）大鼠于足下（脚垫）处注射抗原乳剂，小鼠于脊柱背侧皮下注射抗原乳剂。48H后再注射百日咳毒素。

（3）注射当天为第0天，每日统计动物体重数据、动物疾病临床神经功能分级（Knono评分标准），直至免疫后30天。

（4）分离提取发病动物淋巴结细胞与MBP共培养，做抗原特异性T细胞增殖试验。对T淋巴细胞分离和T细胞CD表型分析。

（5）动物脑脊髓组织病理和免疫组化分析

发病后分离脑组织淋巴细胞FACS，可见到PKH2-GL标记细胞，而肝脾组织中极少发现PKH2-GL阳性细胞，表明具有器官特异性。

颈脊髓的组织学分析

组织学光镜下可见鼠的脑和脊髓组织中有大量的炎性细胞浸润，炎性细胞聚集在血管周围呈现袖套样改变。

模型特点：

给动物注射抗原9-11天开始发病，发病严重会导致动物死亡，未死亡的动物注射3周后开始逐渐恢复。

特别提示：抗原注射部位会影响到EAE模型的最终效果，如：潜伏期长短、发生率高低、死亡率和复发率。

2、被动转移实验：

构建方法：分离EAE抗原特异反应性T细胞，转输给同品系健康动物（空白对照动物），使健康动物发病。

（1）取发病动物淋巴结进行细胞培养，并做CD₄细胞筛选。

（2）测定细胞对抗原的特异性反应，PKH2-GL标记细胞，

（3）给健康动物注射细胞，10天后观察症状，对动物脑组织和脊髓中单个核细胞分离，做细胞表型分析。

模型特点：该实验所建立的动物模型是研究EAE发病机制、治疗预防的理想模型。具有高度可重复性，但没有广泛的原发性脱髓鞘。

参考资料：

[1]人类疾病动物模型复制方法学/周光兴等主编-上海：上海科学技术文献出版社，2008.1

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[4]魏伟,汤熠,魏麓云.EAE大鼠脑红蛋白表达变化研究[J].免疫学杂志,2010,(12):1056-.

[5]吕雪莹, 张凤蕴, 王丽群,等. 实验性变态反应性脑脊髓炎的病理研究[J]. 中国神经免疫学和神经病学杂志, 2000, 7(1):3.

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