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疾病模型|免疫治疗中的huPBMC人源化小鼠模型

发布时间:

2024-05-29 18:02


外周血单核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)即外周血中具有单个核的细胞,主要由淋巴细胞(T或B细胞)、单核细胞、吞噬细胞、树突状细胞和其他少量细胞类型组成,是机体免疫应答功能的重要细胞组成。

 

免疫系统人源化小鼠模型是通过将人的造血细胞、淋巴细胞或组织植入免疫缺陷小鼠体内,从而使其重建人类免疫系统的小鼠模型。它们可有效地重建人类免疫系统,更好地模拟人体免疫特征,可以评价抗肿瘤药物的药效,以期筛选有效的抗肿瘤药物,从而为更多癌症患者带来治愈的希望。有效研究人类肿瘤和免疫系统之间的相互作用。

 

造模方案

| 实验动物:重度免疫缺陷小鼠-NAG

| 实验方案:

① 确定好细胞注射剂量后,按供应商提供材料复苏细胞,调整浓度进行细胞注射;

② 细胞置于4°冰袋传入设施进行注射(尾静脉注射或腹腔注射),接种后,观察小鼠状态;

 

| 实验评价体系:

0GvHD观测

 

 huPBMC细胞接种后,每周两次GvHD观测,根据临床观察进行临床分数(体重、小鼠姿态、活动性、毛发、皮肤等方面)评定评分。

 

0流式检测

 

  接种后每周检测一次流式,小鼠眼眶采血,利用流式细胞术检测mCD45及hCD45、hCD3、hCD4、hCD8细胞比例;接种当天定为D0,检测时间为:D7、D14、D21、D28、D35;
0生存曲线

   记录死亡小鼠情况,绘制生存曲线图。

 

| 实验结果:

图片来源于艾菱菲

 

本研究评价huPBMC-NAG模型重建效果

 

01根据实验终点D29天小鼠生存情况统计数据分析,huPBMC-donor1在NAG小鼠上中存活时间最长。
 

0根据GvHD评分数据分析,huPBMC-donor1和huPBMC-donor2在NAG小鼠上中GvHD反应相对严重。

 
0根据D29天小鼠外周血免疫细胞比例分析,huPBMC-donor1在NAG小鼠上中重建率较好。

 

| huPBMC人源化小鼠模型的优点和局限性

 

huPBMC转导的小鼠模型有各种优点,使其被广泛应用,包括:

0huPBMC转导的小鼠是一种T细胞依赖性模型,大量免疫治疗都涉及T细胞调节/重靶向。

0huPBMC人源化小鼠模型相对容易建立,无需专门培训或资本设备。

0移植时间非常快。
0同一免疫细胞供体可多次使用,以便进行纵向研究。
0huPBMC转导的小鼠模型比其他人源化模型更具成本效益。

尽管该模型很受欢迎,但对该模型的使用仍存在一些犹豫。造成这种情况主要有两个原因:

① GvT的可能性很高,会阻止这一模型中的肿瘤生长。
② 该模型中GvHD的发生缩短了研究的时间。

这两个问题在一定程度上可以通过选择合适的huPBMC供体得到缓解,因为这两种效应的严重程度取决于供体。缓解GvT的供体选择可通过短期共培养试验进行,而缓解GvHD的供体选择需要使用所关注的肿瘤模型的异种移植物进行体内试验。

结论

huPBMC免疫系统人源化小鼠模型主要是将人类PBMC免疫细胞移植到重度免疫缺陷小鼠体内,模拟人类免疫系统,后选择合适的模型尽可能达到重建人类免疫微环境的目的,以模拟人体内的免疫应答以及疾病发生发展的过程。艾菱菲生物可根据实验需求,选择符合需求的huPBMC人源化模型,进行后续相应的动物实验,实验设计更灵活可以给客户提供较好的模型。

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