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21天快速建模!VX2兔肝癌原位模型构建,病理结果/生长曲线/影像特征全解析

发布时间:

2025-07-02 11:06


原发性肝癌(PLC)是一种最常见的恶性肿瘤,VX2兔肝癌原位模型肿瘤发展过程与人肝癌相似,是最理想的肝癌实验模型,在该模型上开发出的药物和疗法对指导临床选择肿瘤治疗方案有重大意义。

 

VX2肿瘤最初由Shope乳头瘤病毒诱导的兔鳞状细胞癌经多次传代获得,具有强侵袭性和快速增殖特性,VX2肿瘤可通过门静脉或肝动脉自发转移至肺、淋巴结等部位,是少数能模拟肝癌转移行为的动物模型。

 
 

VX2 兔肝癌原位模型‌构建

 
 

‌| 开腹植入法‌

 

① 实验动物

 

新西兰大白兔,体重2.5-3.5 kg,年龄在5至6个月。体型适中、耐受性强,适合外科操作‌。

 

② 实验方法

 

瘤块准备:将VX2肿瘤块在37℃下解冻,去除坏死组织和肌肉组织,然后将鱼肉样组织剪碎成1~2mm³的小块,并浸泡在无菌盐水中。

 

手术过程
 
 

实验兔在接种前12小时禁食不禁止饮水。

 

麻醉,腹部切口暴露肝左叶,将瘤块通过穿刺针注入肝左叶,填塞明胶海绵后用无菌棉签按压止血。

 

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将肝脏放回体内,并缝合伤口。术后3天预防性使用抗生素(如恩诺沙星)。

 

④ 注意事项

 

0选取靠近肿瘤边缘生长旺盛的质嫩灰白色鱼肉样组织进行移植,能够相应的提高肿瘤细胞的成活率;
 
 
0建模前对动物进行禁食,可以减小实验动物的肠道返流,避免不必要的不良反应;
 
 
0于肝左叶进行肿瘤组织植入, 肝左叶血液丰富体积较大,有利于肿瘤组织生长。
 
 
 
⑤ 模型特点:

此方法成瘤时间短,种植成功率高,肿瘤呈局限性生长,异位种植少等。

 

 

| 实验结果

 

① 病理组织

 

可见肝左叶明显肿瘤病灶,切开后肿瘤活性成分多中心可见少量坏死。
 

图片

 

 

‌② 生长曲线‌:
 

移植后14天肿瘤直径达2.5±0.3 cm,21天出现中央坏死(CT值下降30-40 HU)。

 

 

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‌② HE结果:

 

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 肝脏中 VX2 肿瘤在不同放大倍率下的数字化组织学切片显示;图片来源【1】

 

 由图可见肿瘤区域出现坏死、囊性腔和纤维基质,具有高核质比、嗜酸性粒细胞/苍白细胞质和边界不清的大未分化肿瘤细胞,坏死区域的凋亡细胞碎片(箭头)。

 

③ 影像学特征

 

CT:

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随着时间的推移,转移瘤的大小增加并变得更具侵袭性。由图可见瘤灶呈低密度,在肝动脉期,瘤灶表现为不同程度的环形强化;在门脉期,瘤灶呈低密度,与周围肝组织分界清楚。
 
 

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图片来源【1】

 
光镜下,肿瘤细胞呈巢状分布,细胞较大、形态不规则、排列紊乱,血窦多,胞核大而深染,胞质量少,肿瘤组织与周围肝组织界限清楚。
 
 
超声/CT引导下经皮穿刺接种法

 

操作步骤:

 

影像引导下确定肝左叶穿刺点,尖刀挑开皮肤后,用穿刺针将瘤块推入肝实质内。术后需连续3天注射抗生素(如青霉素+庆大霉素)。

 

模型特点:
 

创伤小、无腹腔种植风险,模型肿瘤多为孤立结节,便于影像学监测。成功率可达95%以上,与开腹法相当。需选择体型较大的兔以方便操作,穿刺需精准避开肝叶间隙,避免瘤块误植。

 

| 瘤细胞悬液注射法

 

操作步骤:
 

将瘤细胞悬液直接注射至肝包膜下或肝实质内。

 

模型特点:

 

成瘤率低(约79%)、易导致肝内转移或针道种植,且操作复杂,已逐渐被瘤块法取代。
 

总结

选择合适的模型对于研究肝癌的发病机制和药物筛选具有重要意义。艾菱菲生物可提供多种方式构建肝癌动物模型,并针对相关疾病模型进行药理药效等服务,欢迎广大客户前来咨询!

 

参考文献:
【1】Front Oncol. 2022 May 10;12:871829

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